產(chǎn)品上新-人正常結(jié)腸上皮細(xì)胞

培養(yǎng)基 DMEM-H完全培養(yǎng)基：90%DMEM-H+10%FBS 

傳代方法 復(fù)蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速?zèng)]入37℃水浴鍋，搖晃凍存管加速溶解，以1min內(nèi)全部溶解為宜；②在超凈臺(tái)中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9mL完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi)，1000-1200rpm離心5min，棄去上清液，用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。③將細(xì)胞懸液加入到含有5-6mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

細(xì)胞傳代：①將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入1-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，肉眼可見(jiàn)細(xì)胞層脫落，即消化完成，否則繼續(xù)消化），直接吸掉胰酶，加入5-6mL完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落，吹散。③將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。；④注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí)，重復(fù)傳代操作或者凍存。 

生長(zhǎng)條件 培養(yǎng)溫度37℃；氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣； 

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng) 

存儲(chǔ)條件 液氮 

類型 貼壁生長(zhǎng) 

安全等級(jí) 1 

形態(tài) 上皮細(xì)胞樣，多角形，不規(guī)則形，邊緣不規(guī)則，單層貼壁生長(zhǎng)，背景干凈，不產(chǎn)色素 

細(xì)胞壁 分類在細(xì)菌、真菌、植物的生物，其組成的細(xì)胞都具有細(xì)胞壁（Cell Wall），而原生生物則有一部分的生物體具有此構(gòu)造，但是動(dòng)物沒(méi)有。 植物細(xì)胞壁主要成分是纖維素，經(jīng)過(guò)有系統(tǒng)的編織形成網(wǎng)狀的外壁。可分為中膠層、初生細(xì)胞壁、次生細(xì)胞壁。中膠層是植物細(xì)胞剛分裂完成的子細(xì)胞之間，最先形成的間隔，主要成分是果膠質(zhì)（一種多糖類），隨后在中膠層兩側(cè)形成初生細(xì)胞壁，初生細(xì)胞壁主要由果膠質(zhì)、木質(zhì)素和少量的蛋白質(zhì)構(gòu)成。次生細(xì)胞壁主要由纖維素組成的纖維排列而成，如同一條一條的線以接近直角的方式排列，再以木質(zhì)素等多糖類黏接。 真菌細(xì)胞壁則是由幾丁質(zhì)、纖維素等多糖類組成，其中幾丁質(zhì)是含有碳水化合物和氨，性柔軟，有彈性，與鈣鹽混雜則硬化，形成節(jié)肢動(dòng)物的外骨骼。幾丁質(zhì)不溶于水、酒精、弱酸和弱堿等液體，有保護(hù)功能。 細(xì)菌細(xì)胞壁組成以肽聚糖為主。