尿嘧-啶-DNA糖基化酶（UDG）使用說(shuō)明

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

Uracil-DNA Glycosylase簡(jiǎn)稱UDG，來(lái)源于大腸桿菌，可催化含尿嘧-啶的 DNA 鏈中的尿嘧-啶(dU)堿基和脫氧核糖之間的 N-糖苷鍵發(fā)生水解，從而釋放游離尿嘧-啶。Uracil-DNA Glycosylase (UDG)可以水解含有dU的單鏈或雙鏈DNA，但不能水解RNA或含有dU的長(zhǎng)度不超過(guò)6個(gè)堿基DNA寡聚體。UDG主要用于消除PCR擴(kuò)增過(guò)程中帶來(lái)的產(chǎn)物污染問(wèn)題。

來(lái)源：來(lái)源于大腸桿菌，由大腸桿菌重組表達(dá)。

酶活定義：在37℃條件下，1 min內(nèi)催化60 pmol尿嘧-啶從含尿嘧-啶的雙鏈DNA上釋放所需的酶量定義為一個(gè)酶活單位。通過(guò)30 min內(nèi)從50 μL含0.2 μg DNA (104-105cpm/µg)的反應(yīng)體系中釋放[3H]-尿嘧-啶的量來(lái)確定酶活。

純度及濃度：SDS-PAGE檢測(cè)純度≥95%；5 U/μL。

失活：95℃孵育10 min可以使95% UDG失活。

酶存儲(chǔ)buffer：10 mM Tris-HCl，50 mM KCl，0.1 mM EDTA，1 mM DTT，0.1 mg/mL BSA，50%glycerol，pH 7.4。

10х UDG Reactin buffer：200 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA, 10 mM DTT, pH 8.0。