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GNOMIC 人腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA *

更新時(shí)間:2014-07-30      瀏覽次數(shù):1767

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1 人TNF-α前體由233個(gè)氨基酸組成(26 kDa),其中包含由76個(gè)氨基酸殘基組成的信號(hào)肽,在TNF轉(zhuǎn)化酶TACE的作用下,切除信號(hào)肽,形成成熟的157個(gè)氨基酸殘基的TNF-α(17 kDa)。由于沒(méi)有蛋氨酸殘基,故不存在糖基化位點(diǎn),其中第69位和101位兩個(gè)半胱氨酸形成分子內(nèi)二硫鍵。人類 TNF-α與小鼠 TNF-α有79%氨基酸組成同源性,TNF-α的生物學(xué)作用似無(wú)明顯的種屬特異性。zui近有人報(bào)道通過(guò)基因工程技術(shù)表達(dá)了N端少2個(gè)氨基酸(Val、Arg)的155氨基酸人TNF-α,具有更好的生物學(xué)活性和抗腫瘤效應(yīng)。此外,還有用基因工程方法,將TNF-α分子氨基端7個(gè)氨基酸殘基缺失,再將8Pro、9Ser和10Asp改為8Arg、9Lys和10Arg,或者再同時(shí)將157Leu改為157Phe,改構(gòu)后的TNF-α比天然TNF體外殺傷L929細(xì)胞的活性增加1000倍左右,在體內(nèi)腫瘤出血壞死效應(yīng)也明顯增加。TNF-α和β發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)的天然形式是同源的三聚體。

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2 人類TNF-β分子由205個(gè)氨基酸殘基組成,含34氨基酸殘基的信號(hào)肽,成熟型TNF-β分子為171個(gè)氨基酸殘基,分子量25kDa。
3 人類TNF-β與TNF-α其DNA同源序列達(dá)56%,氨基酸水平上同源性為36%。應(yīng)用X射線晶體衍射技術(shù)證明, TNF是由三個(gè)相同的單體亞單位組成的致密三聚體, 單體亞單位呈楔形,由β片層折疊形成β夾心結(jié)構(gòu)(β-Sandwich structure)。

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