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實驗操作過程 
1、計算使用微孔的數(shù)量，包括要檢測的樣品、標準品、對照所用的微孔，每一個樣品、標準品、空白對照應該做兩個孔，一式兩份。 
2、預洗板，每個微孔用400μl的wash buffer清洗，清洗2遍，每次用時10-15秒。zui后一遍清洗完后要清空微孔，微孔板放在吸水紙上的時間不能超過15分鐘，不要讓微孔干燥，清洗完后立即使用。 3、標準品在微孔上稀釋，加100μl Sample Diluent至S1—77個標準空中，吸取100μl準備好的標準品放到S1中,混勻后吸取100μl放到S2中，混勻后吸取100μl放到S3中。。。。。依次到S7，吸取S7中100μl液體棄去，保證每個微孔都是100μl。注意在加液體過程中不要碰到微孔的內(nèi)壁。 4、加100μl Sample Diluent至空白對照孔，一式兩份。 5、加50μl Sample Diluent至每個樣品孔中 6、加50μl 準備好的血清樣品至每個樣品孔中 
7、用黏膜覆蓋后在室溫下放在微盤震蕩機上孵育2小時，設(shè)置100rpm。 8、準備Biotin-conjugate 
9、2小時后去掉微孔板上的黏膜，清空液體，每個微孔用400μl的wash buffer清洗，每空清洗4遍后進行下一步。 
10、加100μlBiotin-conjugate至所有微孔 
11、用黏膜覆蓋后在室溫下放在微盤震蕩機上孵育1小時，設(shè)置100rpm。 12、準備Streptavidin-HRP 
13、1小時后去掉微孔板上的黏膜，清空液體，每個微孔用400μl的wash buffer清洗，每空清洗4遍后進行下一步。 
14、加100μlStreptavidin-HRP至所有微孔，包括空白對照孔。 
15、用黏膜覆蓋后在室溫下放在微盤震蕩機上孵育1小時，設(shè)置100rpm。 
16、1小時后去掉微孔板上的黏膜，清空液體，每個微孔用400μl的wash buffer清洗，每空清洗4遍后進行下一步。 
17、加100μl TMB Substrate Solution 至所有微孔。 
18、室溫下18--25℃孵育10分鐘，避免直接暴露在強光下。當濃度zui高的標準品的微孔顏色變成深藍色時，加終止液（the stop solution）或者S1的標準孔在620nm的OD值達到0.9-0,95 
19、每個微孔加100μl stop solution終止酶的反應，必須迅速而且*的加入到每個微孔以能*使酶失活。結(jié)果應在終止液加入后立即讀取，或者，如果微孔板要放在2--8℃的暗處存放，可以再1小時內(nèi)讀結(jié)果。 
20、測量每個微孔板的光度值，選擇450nm（備選620nm）

人白介素10（IL-10）elisa 試劑盒

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