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南京信帆生物技術(shù)有限公司主營(yíng)生物試劑和銷售---
豚鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒
此ELISA試劑盒的英文名稱是---
Guinea pig Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA kit
規(guī)格：	96T/48T
我們的elisa試劑盒具有如下優(yōu)點(diǎn)：

一、高效、靈敏、特異的抗體；
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；
五、性價(jià)比非常好，節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡(jiǎn)稱。自上世紀(jì)70年代初問(wèn)世以來(lái)，發(fā)展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。
豚鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒
Guinea pig Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA kit
ELISA技術(shù)原理：以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底
物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)
1. 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。
2. 結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。
3. 酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。
4. 受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。
5. 此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
6. 加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。測(cè)定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重復(fù)性好。
豚鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒
Guinea pig Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA kit

我們采用的酶：		辣根過(guò)氧化酶（HRP）
1. HRP在蔬菜作物辣根中含量很高。
2. 是一種糖蛋白，含糖量約18％；分子量為44kD。
3. 是一種復(fù)合酶，由主酶（酶蛋白）和輔基（亞鐵血紅素）結(jié)合而成的一種卟啉蛋白質(zhì)。
4. 主酶為無(wú)色糖蛋白，在275nm波長(zhǎng)處有zui高吸收峰；輔基是深棕色的含鐵卟啉環(huán)，在403nm波長(zhǎng)處有zui高吸收峰。
HRP催化下列反應(yīng)：
DH2+H2O2<==HRP==>D+2H2O
上式中DH2為供氫體，H2O2為受氫體。HRP對(duì)受氫體的專一性很高，除H2O2外，僅作用于小分子醇的過(guò)氧化物和尿素的過(guò) 氧化物。后者為固體，作為試劑較H2O2方便。許多化合物可作為HRP的供氫體，在ELISA中常用的供氫體底物為鄰苯二胺（orthopenylenediamine，OPD）、四甲基聯(lián)苯胺（3，3'， 5，5'-tetramethylbenzidine，TMB）和ABTS[2，2'-azino- bis(3-ethyl-benzthiazolinesulfonate-6)]。
豚鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒
Guinea pig Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA kit
測(cè)定步驟
1.加樣
	1. 除包被外都需45度加樣
	2.加樣體積要準(zhǔn)確
	3.管底加樣，不能加在管壁上
	4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
	1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫度的水浴箱。
	2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
	3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅\|有濕紗布的金屬濕盒中。
	4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，以便不時(shí)觀察，待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
	1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟，但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
	2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
	1.陰性對(duì)照顏色極淺，在定性測(cè)定中一般可采用目視比色。
	2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
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