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大鼠凋亡誘導(dǎo)因子ELISA試劑盒
  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2018-02-08
  • 訪  問  量:1275
簡(jiǎn)要描述:

大鼠凋亡誘導(dǎo)因子ELISA試劑盒,AIF 試劑盒由南京信帆生物代理銷售,酶聯(lián)免疫技術(shù)服務(wù),免費(fèi)代測(cè),售后完善。有任何問題,歡迎隨時(shí)咨詢。如果需要試劑盒說明書,可在線客服或來電索要。

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產(chǎn)品詳情

本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn),不得用于醫(yī)療或食用

大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒
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1. 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。
2. 結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。
3. 酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。
4. 受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記 的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。
5. 此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
6. 加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量 與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定 性或定量分析。測(cè)定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水 平),并且重復(fù)性好。
大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒
樣本處理及要求:
ELISA 的樣本實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備 在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng) 天就進(jìn)行 檢測(cè)的樣本,及時(shí)儲(chǔ)存在 4℃?zhèn)溆谩?duì)于隔天再檢測(cè)的樣本,及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫?有條件的,-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒
操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為30ng/L,20ng/L ,10ng/L,5ng/L, 2.5ng/L)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請(qǐng)避光保存。
7. 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。




XF02033B大鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒
XF02034B大鼠生長(zhǎng)抑素(SS)ELISA試劑盒
XF02035B大鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒
XF02036B大鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α (sm Actinin-α )ELISA試劑盒
XF02037B大鼠肌球蛋白(Myosin)ELISA試劑盒
XF02038B大鼠結(jié)蛋白(Des)ELISA試劑盒
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XF02041B大鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒
XF02042B大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒
XF02043B大鼠生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒
XF02044B大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒
XF02045B大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒
XF02046B大鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒
XF02047B大鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒
XF02048B大鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA試劑盒
XF02049B大鼠糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)ELISA試劑盒
XF02050B大鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒
XF02051B大鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒
XF02052B大鼠透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒
XF02088B大鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒
XF02089B大鼠血管生長(zhǎng)素(ANG)ELISA試劑盒
XF02090B大鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒
XF02091B大鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA試劑盒
XF02092B大鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒
XF02093B大鼠雌激素(E)ELISA試劑盒
XF02094B大鼠脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒
XF02095B大鼠游離β絨毛膜促性腺激素(f-βCG)ELISA試劑盒
XF02096B大鼠醛固酮(ALD)ELISA試劑盒
XF02097B大鼠去甲腎上腺素(NA)ELISA試劑盒
XF02098B大鼠前列腺素F(PGF)ELISA試劑盒
XF02099B大鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA試劑盒
XF02100B大鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒
XF02101B大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒
XF02102B大鼠血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒
XF02103B大鼠抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒
XF02104B大鼠催乳素(PRL)ELISA試劑盒
XF02105B大鼠促生長(zhǎng)激素釋放激素(GRH)ELISA試劑盒
XF02106B大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒
XF02107B大鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒
大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒
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